Нингидриновая реакция на определение аминокислот и белка - История изменений

Admin в 12:57, 21 мая 2014

2014-05-21T12:57:40Z

Febor: /* Спектрофотометрическое исследование продуктов нингидриновой реакции */

2014-03-31T10:28:53Z

‎Спектрофотометрическое исследование продуктов нингидриновой реакции

Febor: /* Список литературы */

2014-03-31T10:26:46Z

‎Список литературы

Febor: /* Спектрофотометрическое исследование продуктов нингидриновой реакции */

2014-03-31T10:25:27Z

‎Спектрофотометрическое исследование продуктов нингидриновой реакции

Febor: /* Исследование реакции а-аминокислот с 0,2 % раствором нингидрина в диметилсульфоксиде = */

2014-03-31T10:23:21Z

‎Исследование реакции а-аминокислот с 0,2 % раствором нингидрина в диметилсульфоксиде =

Febor в 02:29, 28 марта 2014

2014-03-28T02:29:54Z

Febor в 02:27, 28 марта 2014

2014-03-28T02:27:23Z

Внесённые изменения

Febor в 17:17, 27 марта 2014

2014-03-27T17:17:18Z

Внесённые изменения

Admin в 11:58, 27 марта 2014

2014-03-27T11:58:05Z

Admin в 11:43, 27 марта 2014

2014-03-27T11:43:15Z

@@ Строка 19: / Строка 19: @@
 Более доступными и простыми являются фотоколориметрические и спектрофотометрические методы анализа о-аминокислот, основанные на их взаимодействии с нингидрином. Так, В.А. Храмовым модифицирован метод определения диаминокислот по Чинарду [12]. Метод основан на образовании красно-коричневых продуктов взаимодействия диаминокислот с нингидрином с последующим фотоколориметрическим определением при длине волны 490 нм. Метод является специфичным: нейтральные аминокислоты, а также амины и диамины при pH 1 с нингидрином окрашенных продуктов не образуют. Несмотря на доступность и простоту данный метод не является универсальным для всех а-аминокислот и позволяет определить лишь диаминокислоты, из которых наибольшее практическое значение имеет незаменимая аминокислота лизин. Кроме того, этим методом можно определить пролин.
-Разработана точная методика количественного определения кислоты аспарагиновой в лекарственном препарате «Аспаркам», основанная на ее взаимодействии с 1 % этаноловым раствором нингидрина и последующим определением оптической плотности продукта реакции при длине волны 568 нм. Метод отличается хорошей воспроизводимостью, относительная ошибка среднего результата составила ±2,25 % [19]. Кроме того, предложен спектрофотометрический метод анализа суммы аминокислот различных видов пыльцы, основанный на взаимодействии с 2 % этаноловым раствором нингидрина [11].
+Разработана точная методика количественного определения кислоты аспарагиновой в лекарственном препарате «[[Аспаркам]]», основанная на ее взаимодействии с 1 % этаноловым раствором нингидрина и последующим определением оптической плотности продукта реакции при длине волны 568 нм. Метод отличается хорошей воспроизводимостью, относительная ошибка среднего результата составила ±2,25 % [19]. Кроме того, предложен спектрофотометрический метод анализа суммы аминокислот различных видов пыльцы, основанный на взаимодействии с 2 % этаноловым раствором нингидрина [11].
 С этих позиций представляет интерес изучение спектральных характеристик продуктов нингидриновой реакции 20-ти наиболее важных в биологическом отношении а-аминокислот, оптимизация условий ее проведения с целью разработки точного и доступного метода количественного определения    а-аминокислот в растительном сырье, субстанциях и суммарных лекарственных препаратах.

@@ Строка 1: / Строка 1: @@
 == Спектрофотометрическое исследование продуктов нингидриновой реакции ==
-Разработка точных, доступных методов анализа а-[[Аминокислоты|аминокислот]] является одной из актуальных задач современной фармации, в данной статье описан простой и доступный способ определения аминокислот и белка в различных продуктах, включая [[Биологически активные добавки|биологически-активные добавки]] и [[спортивное питание]].
+Разработка точных, доступных методов анализа а-[[Аминокислоты|аминокислот]] является одной из актуальных задач современной фармации, в данной статье описан простой и доступный способ определения аминокислот и [[протеин]]а в различных продуктах, включая [[Биологически активные добавки|биологически-активные добавки]] и [[спортивное питание]].
 В настоящее время существует ряд методов количественного определения а-аминокислот в лекарственном растительном сырье, в лекарственных препаратах и биологических жидкостях [1—31]. Однако, несмотря на высокую точность, их применение ограничено длительностью приготовления рабочих растворов (потенциометрическое титрование в неводной среде), дороговизной оборудования (ГЖХ, ВЭЖХ) [4, 6,27,28, 30].
@@ Строка 11: / Строка 11: @@
 На первой стадии реакции о-аминокислот с нингидрином (I) образуются углерода диоксид, альдегид и устойчивое промежуточное соединение - 2-аминоиндандион (II), участвующий в двух параллельных реакциях. В одной из них он реагирует с нингидрином до образования 2-гидроксииндандиона (III) и 2-иминоиндандиона (IV), которые, конденсируясь между собой, формируют дикетогидринденкетогидринамин (V). Во второй реакции 2-аминоиндандион в кислой среде подвергается гидролизу до аммиака и 2-гидроксииндандиона, последний, взаимодействуя с нингидрином, образует гидриндантин (VI).
-Установлено, что характерная для большинства а-аминокислот пурпурная окраска(окраска    Румана)    обусловлена    образованием дикетогидринденкетогидринамина (V), а также продукта параллельной реакции -гидриндантина (VI), который мало растворим в воде и растворим в органических растворителях - диметилсульфоксиде (ДМСО) и метилцелозольве. Поэтому, с целью повышения чувствительности реакции, по предположению авторов, наиболее рационально использовать растворы нингидрина в указанных растворителях. Максимальные значения оптической плотности продуктов реакции (при длине волны 575 нм) наблюдаются при соблюдении следующих условий ее проведения: температура реакционной смеси - 95 °С, pH — 5-6. Кроме того, реакцию необходимо проводить без доступа кислорода, в атмосфере азота.
+Установлено, что характерная для большинства а-аминокислот пурпурная окраска(окраска Румана) обусловлена образованием дикетогидринденкетогидринамина (V), а также продукта параллельной реакции - гидриндантина (VI), который мало растворим в воде и растворим в органических растворителях - диметилсульфоксиде (ДМСО) и метилцелозольве. Поэтому, с целью повышения чувствительности реакции, по предположению авторов, наиболее рационально использовать растворы нингидрина в указанных растворителях. Максимальные значения оптической плотности продуктов реакции (при длине волны 575 нм) наблюдаются при соблюдении следующих условий ее проведения: температура реакционной смеси - 95 °С, pH — 5-6. Кроме того, реакцию необходимо проводить без доступа кислорода, в атмосфере азота.
 Для детектирования продукта нингидриновой реакции используют спектрофотометры, флуориметры.

@@ Строка 814: / Строка 814: @@
 На этом основании разработаны методы количественного определения а-аминокислот в лекарственных препаратах и растительном сырье, основанные на реакции с 0,2 % водным раствором нингидрина. Разработанные методы отличаются достаточной точностью (относительная ошибка результата отдельного определения для всех образцов не превышает ±3 %) и доступностью.
 == Список литературы ==
@@ Строка 877: / Строка 883: @@
 .    Kuryt T. Quantitative analysis of amino acids in biological fluids by gas chromatography with flame ionization detection / T. Kuryt, D. Sawnor-Corszynska // Acta chromatogr. - 2000. - № 10. - P. 97-103.
 .    Yu Hong. Определение аминокислот и глюкозы в аминокислотных инъекционных растворах методом анионообменной хроматографии с интегрированным импульсным амперометрическим детектированием

@@ Строка 1: / Строка 1: @@
 == Спектрофотометрическое исследование продуктов нингидриновой реакции ==
-Разработка точных, доступных методов анализа а-[[Аминокислоты|аминокислот]] является одной из актуальных задач современной фармации.
+Разработка точных, доступных методов анализа а-[[Аминокислоты|аминокислот]] является одной из актуальных задач современной фармации, в данной статье описан простой и доступный способ определения аминокислот и белка в различных продуктах, включая [[Биологически активные добавки|биологически-активные добавки]] и [[спортивное питание]].
 В настоящее время существует ряд методов количественного определения а-аминокислот в лекарственном растительном сырье, в лекарственных препаратах и биологических жидкостях [1—31]. Однако, несмотря на высокую точность, их применение ограничено длительностью приготовления рабочих растворов (потенциометрическое титрование в неводной среде), дороговизной оборудования (ГЖХ, ВЭЖХ) [4, 6,27,28, 30].

@@ Строка 486: / Строка 486: @@
 На этом основании нами изучены продукты нингидриновой реакции в нелетучем растворителе - диметилсульфоксиде (ДМСО).
-== Исследование реакции а-аминокислот с 0,2 % раствором нингидрина в диметилсульфоксиде ===
+== Исследование реакции а-аминокислот с 0,2 % раствором нингидрина в диметилсульфоксиде ==
 В следующей серии экспериментов в качестве растворителя для нингидрина мы использовали диметилсульфоксид (ДМСО). Растворы нингидрина в ДМСО часто используют для количественного определения аминокислот с помощью аминокислотных анализаторов [1]. Важно отметить, что ДМСО имеет преимущества по сравнению с ацетоном: данный растворитель нелетучий, имеет невысокую токсичность, взрыво- и пожаробезопасен, что обеспечивает удобство его использования.

@@ Строка 725: / Строка 725: @@
 <p>0,39667</p></td><td>
 <p>1</p></td></tr>
 <tr><td>
 <p>5</p></td><td>

← Предыдущая		Версия 11:58, 27 марта 2014
Строка 1:		Строка 1:


−	*Количественное определение глицина в таблетках	+	*[[Количественное определение глицина в таблетках]]
−	*Количественное определение белка в продуктах	+	*[[Количественное определение белка в продуктах]]

← Предыдущая		Версия 11:43, 27 марта 2014
Строка 2:		Строка 2:

	*Количественное определение глицина в таблетках		*Количественное определение глицина в таблетках
−	*Количественное определение ~~протеина~~ в продуктах	+	*Количественное определение белка в продуктах